小麦白粉病菌基因组DNA的微量提取及ISSR-PCR反应体系的优化

作者：朱海荣; 段霞瑜; 周益林; 邱永春

来源：植物保护, 2010, (03): 125-129.

• 小麦白粉病菌
• DNA微量提取
• ISSR-PCR
• 体系优化 wheat powdery mildew
• DNA microextraction
• ISSR
• optimization of PCR reaction

为了寻找适合小麦白粉菌基因组DNA微量提取的方法,本试验利用改进的CTAB法、电钻微量研磨一管法、FastPrep DNA试剂盒法和Chelex-100法分别提取小麦白粉菌基因组DNA。比较得出,在微量提取时,CTAB法的提取率较高;在分生孢子量较多时,FastPrep DNA试剂盒方法提取的DNA质量较高,这两种方法提取的DNA均适用于ISSR-PCR。采用正交设计L16(45)法优化了适合于小麦白粉病菌群体的ISSR体系,确定了25μL时优化的反应体系:1×buffer、模板DNA0.5ng、dNTP0.14mmol/L、TaqDNA聚合酶1U、引物1.4μmol/L、Mg2+1.8mmo...

• 单位
  沈阳农业大学; 中国农业科学院植物保护研究所; 植物病虫害生物学国家重点实验室