一种海岛棉U6启动子在CRISPR/Cas9基因组编辑体系中的功能鉴定

作者：藏旭阳; 代培红; 李继洋; 蒲艳; 刘晓东^*; 顾爱星^*

来源：新疆农业大学学报, 2018, 41(01): 31-35.

• 棉花
• CRISPR/Cas9
• 基因组编辑
• U6启动子
• 原生质体

U6启动子是CRISPR/Cas9基因编辑系统的重要元件之一。本研究以实验室已克隆的海岛棉U6启动子构建GbU6-1P启动子驱动sgRNA,构建以抗旱负调控基因GGB为靶序列的CRISPR/Cas9基因编辑载体,转入棉花‘新海16号’原生质体中,进行功能鉴定。经酶切实验验证、测序、数据统计等确认GbU6-1P启动子在基因编辑系统中的效果。结果表明,以GbU6-1P启动子构建的CRISPR/Cas9基因编辑体系可以成功地定点编辑棉花内源靶基因GGB,引起基因突变,突变率为34.5%,突变类型全部为碱基替换。

• 单位
  新疆农业大学