摘要
为了在斑马鱼中探索诱导型一氧化氮合酶(Nos2)在生长调控中的作用,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,首次构建了可稳定遗传的nos2a缺失型(nos2a-/-)斑马鱼家系。通过监测其生长过程发现,nos2a-/-斑马鱼的整体生长趋势较nos2a正常型(nos2a+/+)斑马鱼偏低,且nos2a-/-成鱼的体型显著小于同期的nos2a+/+斑马鱼(P<0.01):nos2a+/+成鱼体长(29.53±0.60) mm,nos2a-/-成鱼体长(26.34±0.69) mm;nos2a+/+成鱼体质量(512.80±30.75) mg,nos2a-/-成鱼体质量(394.40±16.91) mg;而在肌纤维密度(P=0.718)及躯椎骨的横截面积上(P=0.548)两者没有显著差异。qPCR检测发现,出膜8 d时,nos2a-/-斑马鱼的生长激素基因gh1的mRNA水平(P<0.01)及类胰岛素生长因子基因igf1的mRNA水平(P<0.001)均显著低于nos2a+/+斑马鱼;出膜68 d时,nos2a-/-斑马鱼的gh1(P<0.000 1)和igf1(P<0.000 1)的mRNA水平同样显著低于nos2a+/+斑马鱼。以上结果表明,斑马鱼中nos2a的功能缺失导致鱼体生长受到抑制,而gh1及igf1 mRNA的水平下调是其潜在原因。
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