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摘要
为探究泛素连接酶库伦-5(Cullin5,Cul5）对牛骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响，本实验采用牛肌卫星细胞进行体外实验模拟牛体内的成肌分化过程，根据基因的表达序列设计Cul5的小干扰RNA(siRNA），通过实时定量PCR(qRT-PCR）蛋白质印迹（Western Blot）技术筛选出干扰效果最好的si-RNA转染细胞。成功干扰Cul5后，在转录、蛋白、细胞水平上分别采用qRT-PCR、Western Blot和EdU细胞增殖实验，检测细胞增殖及分化标志因子的表达水平。试验发现，干扰Cul5后，在蛋白水平上Pax7呈显著上调趋势，MyHC呈显著下调趋势，EdU染色阳性细胞率与对照组相比呈显著上调趋势。细胞光镜图下，实验组肌管的数量明显少于对照组。研究结果可见：敲低Cul5的表达能够促进牛肌卫星细胞的增殖，并抑制其分化进程。
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