摘要
目的 探究雷帕霉素增强RSL3对睾丸癌细胞I-10的增殖、侵袭与迁移能力的抑制作用。方法 MTT法检测RSL3(Type II)及合用雷帕霉素(RAPA)作用后I-10细胞的存活率。将RSL3(0~16μmol/L)分别以及联合16μmol/L雷帕霉素作用于睾丸癌细胞I-10,采用MTT法检测I-10细胞增殖抑制情况,利用集落克隆形成实验检测细胞增殖能力,采用划痕实验和Transwell小室检测I-10细胞的迁移与侵袭能力,采用流式细胞术检测I-10细胞的脂质活性氧水平,采用GSH和MDA检测试剂盒检测细胞中GSH和MDA含量,利用Western blot检测细胞GPX4蛋白表达。结果 随着RSL3浓度的提高,其对I-10细胞的毒性作用逐渐增强。在合用雷帕霉素后,对细胞的毒性进步一增强。与对照组相比,单用RSL3组I-10细胞集落形成数减少(P<0.05)、划痕愈合率降低(P<0.01)、侵袭和迁移细胞数减少(P<0.05)、脂质活性氧水平升高(P<0.0001)、GSH含量降低(P<0.01)、MDA含量升高(P<0.05)、GPX4蛋白表达水平降低(P<0.01);与单用RSL3组相比,雷帕霉素联用RSL3组集落形成数、侵袭和迁移细胞数进一步减少(P<0.05),划痕愈合率、GSH含量、GPX4蛋白表达水平进一步降低(P<0.01,P<0.05),脂质活性氧水平、MDA含量进一步升高(P<0.05,P<0.01)。结论 雷帕霉素增强RSL3对睾丸癌细胞I-10的增殖、侵袭与迁移的抑制作用,其机制与其能够增强RSL3诱导的铁死亡有关。
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