间接ELISA测定人血IgM型抗-A抗体方法的建立及应用

作者：宋敏; 范娅涵; 王世春; 张强; 徐婷; 蒋天伦; 赵树铭

来源：第三军医大学学报, 2018, 40(07): 556-560.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201711078

• ABO血型
• 血影
• 血型抗体
• 定量
• ELISA

目的建立间接酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法,快速定量检测人血IgM抗-A抗体。方法通过制备A型红细胞膜蛋白作为捕获抗原,采用棋盘滴定实验筛选出最佳抗原抗体工作浓度,建立人血IgM型抗-A抗体定量检测方法。结果所构建的间接ELISA定量检测方法检测下限为0.02μg/mL;批内变异系数及批间变异系数均小于10%;通过ROC曲线分析,当临界D(450)为0.259时,ROC曲线下面积最大,为0.947,检测灵敏度为87.7%,特异性为100%。采用本研究自建的ELISA检测57例B型血浆标本的IgM型抗-A抗体浓度为(1.71±1.95)μg/mL,定量结果与经典半定量效价评分呈正相关(r=0.71,P<0.01)。结论成功建立了人血IgM型抗-A抗体定量检测方法。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 第三军医大学; 第一附属医院输血科