摘要

目的 采用一种高效的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞株构建方法获得稳定高表达治疗性重组蛋白的CHO细胞株。方法 利用自主研发载体构建含目的基因的真核表达质粒,经电击转染转入CHO细胞中,经抗性压力筛选后使用细胞池至单克隆的一步筛选策略,配合一种新型的细胞成像系统,高效、快速地筛选出高表达单克隆株。结果 成功构建多株稳定的高表达单克隆细胞株,其产量最高可至5.2 g·L-1;实验通过毛细管等电聚焦电泳法等进一步验证了细胞株产物关键质量特性,等电点均为9.2,所得抗体等电点较好。结论 相比传统的构建方法需6~8个月,本研究筛选得到的高表达单克隆细胞株周期缩短了2个月。