摘要
通过形态学及PCR扩增ITS基因鉴定1株疑似羊源土曲霉(命名为MSF2株),并扩增其毒力因子;通过腹腔注射MSF2菌株孢子悬液感染小鼠,用试剂盒检测血清生化指标;PCR扩增各组织ITS基因及GMS染色观察霉菌在各组织的分布;HE染色观察各组织病理变化。结果显示,MSF2菌株与土曲霉形态特征一致;扩增ITS基因得到595 bp的片段,与GenBank中登录的土曲霉(MN429211.1)同源性为99.81%;综合鉴定MSF2菌株为土曲霉(Aspergillus terreus)。检测出分生孢子黑素(Alb1)、小G蛋白(Rho1)、蛋白激酶A调节亚基(PKAR)、过氧化氢酶1(Cat1)、碱性蛋白酶(Alp2)、核糖核酸酶(AspF1)毒力基因。试验组小鼠精神萎靡、食欲下降;腹腔积液,肾脏、脾脏肿大,肺脏出血,小肠黏膜出现红色血栓;血清白蛋白(ALB)含量降低(P<0.05),碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、球蛋白(GLB)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)和尿酸(UA)含量升高(P<0.01);心脏、肝脏、脾脏等组织均扩增出ITS基因;心脏、肝脏、脾脏等组织均有被染成的黑色菌丝出现;心肌细胞肿大,玻璃样变;肝脏细胞肿胀变性、坏死,中央静脉周围炎性细胞聚集;脾脏红髓区充血,淀粉样变性;肺泡上皮细胞脱落,炎性细胞浸润;肾小管上皮细胞坏死、脱落;小肠部分绒毛脱落,肠腺内充血。结果表明,MSF2菌株是土曲霉,且对小鼠具有较强致病性,研究结果为土霉菌病的诊断和防治提供参考资料。
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单位四川省畜牧科学研究院; 西南民族大学