独行菜法尼基焦磷酸合酶基因的克隆与原核表达

作者：马利刚; 赵乐; 付小蝶; 冯卫生; 匡海学; 郑晓珂

来源：中国生物化学与分子生物学会中医药生物化学与分子生物学分会2017学术年会暨第八届理事会第四次会议.

• 独行菜
• 强心苷
• 生物合成
• 法尼基焦磷酸合酶
• 基因克隆
• 原核表达

目的:从独行菜Lepidium apetalum中克隆强心苷合成途径的法尼基焦磷酸合酶(farnesyl pyrophosphate synthase,FPS)基因,并在大肠杆菌中表达. 方法:分析前期获得的独行菜幼苗转录组数据,选择其中注释为FPS且具有完整开放阅读框的序列,从独行菜叶片cDNA中通过PCR克隆该序列,并进行序列分析.将该基因通过pET-32a载体在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达. 结果:克隆得到独行菜FPS基因的cDNA序列,GenBank登录号KY366218,命名为LaFPS.序列含有1161bp的开放阅读框,推测编码386个氨基酸.构建的载体pET-32a-LaFPS在大肠杆菌中成功诱导表达. 结论:成功克隆了独行菜FPS基因,并建立了原核表达体系,为独行菜强心苷合成途径的进一步研究提供了基础.

• 单位
  黑龙江中医药大学; 河南中医药大学