摘要

在水稻种植生产上,因其种子经常发芽率不齐,导致水稻直播困难,不仅影响水稻的生产成本还影响其产量,因此水稻直播的突出问题要保持优良的种子萌发力。ABA是种子萌发的抑制因子,它通过诱导ABI5的表达来抑制种子萌发,在种子正常萌发的过程中,随着种子吸胀和GA生物合成,ABA和ABI5的含量都迅速下降,促使种子萌发。本研究主要目的是,利用CRISPR/Cas9技术构建OsABI5突变体,提高种子的萌发率和萌发速度。通过农杆菌介导法将构建好的OsABI5敲除质粒转化日本晴水稻的愈伤组织,经PCR和Western blot鉴定筛选得到两株OsABI5弱表达的阳性突变株系。通过对osabi5-2突变体和日本晴萌发表型的观察,发现osabi5-2突变体2天发芽率显著高于日本晴,二者4天的萌发势也是osabi5-2突变体略高。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了OsABI5突变体,对研究水稻OsABI5调控种子萌发的分子机制具有重要意义。