HPLC法测定2种保护组氨酸衍生物中的对映体

作者：孙宝丹; 周灵祺; 柳宏巧

来源：中国医药工业杂志, 2021, 52(10): 1366-1376.

DOI：10.16522/j.cnki.cjph.2021.10.014

• 高效液相色谱法
• 对映体杂质
• N-苄氧羰基-L-组氨酸
• 1-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[(9H-芴基-9-甲氧基)-羰基]-L-组氨酸

建立了HPLC法测定N-苄氧羰基-L-组氨酸(Cbz-L-His-OH)和1-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[(9H-芴基-9-甲氧基)羰基]-L-组氨酸[Fmoc-L-His(Boc)-OH]中对映体杂质的含量。色谱柱采用DAICEL CHIRALPAK? ZWIX(+)柱(3.0 mm×150 mm,3.0 μm),流动相为甲醇∶水∶甲酸∶二乙胺(900∶100∶1.9∶4.16),柱温为35 ℃,流速为0.2 ml/min,进样量为10 μl,检测波长为220 nm。结果显示,Cbz-His-OH的L和D构型、Fmoc-His(Boc)-OH的L和D构型均能达到有效分离,分离度均大于2.0;Cbz-D-His-OH和Fmoc-D-His(Boc)-OH的检测限为141、50 ng/ml,定量限为476、163 ng/ml。2对对映体在相应浓度范围内与峰面积的线性关系良好,Cbz-D-His-OH和Fmoc-D-His(Boc)-OH的加样回收率均为90.0%～100.0%,RSD(n=9)均小于3.0%。样品测定结果显示,Cbz-L-His-OH和Fmoc-L-His(Boc)-OH中对映体杂质含量均小于0.01%。建立的方法专属性强、重复性好、准确度高,可为Cbz-L-His-OH和Fmoc-L-His(Boc)-OH中对映体杂质含量的测定提供参考。