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摘要
为研制预防猪流行性腹泻病毒（PEDV）变异株感染的重组伪狂犬病病毒（PRV）活载体疫苗，本研究应用PRV变异株的细菌人工染色体和同源重组技术，将PEDV流行株的S基因表达盒插入PRV基因组UL40与UL41之间的非编码区，构建重组病毒rPRV-S(UL40-41)，该毒株还缺失了TK和gE基因。生长动力学显示该毒株在猪睾丸（ST）细胞的增殖效率与亲本毒株相似，表明S基因表达盒的插入对病毒生长性能无显著影响。重组病毒在ST细胞传至15代，PCR和测序鉴定S基因未发生碱基的丢失和变异，间接免疫荧光显示重组病毒感染鸡胚成纤维细胞后可稳定表达S蛋白。应用该毒株接种断奶仔猪，产生低水平的针对PEDV的抗体。该研究为PRV活载体疫苗的构建奠定了基础。
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单位江苏省农业科学院; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
