重金属镍胁迫下酿酒酵母实时荧光定量PCR内参基因的筛选

作者：边金; 郭艳飞; 张治; 张淑慧; 赵秀娟

来源：内蒙古科技大学学报, 2018, 37(01): 11-75.

DOI：10.16559/j.cnki.2095-2295.2018.01.003

• 镍胁迫
• 酿酒酵母
• 实时荧光定量PCR
• 内参基因

实时荧光定量PCR因其灵敏性、精确性及易操作性被广泛应用于检测基因的表达差异等实验中.在进行qRT-PCR前,筛选表达稳定的内参基因对数据的分析处理及实验的可信性是必要的.本研究以镍胁迫下的酿酒酵母BY4741,H4K5R为材料,利用qRT-PCR检测5种候选内参基因β-actin,PDA1,ALG9,TDH3,TAF10的表达水平,通过Ge Norm软件分析候选内参基因的稳定参数M,从小到大依次为β-actin(0.808)<TDH3(0.876)<PDA1(1.006)<ALG9(1.008)<TAF10(1.308),β-actin表达最稳定;通过Norm Finder软件分析候选内参基因的稳定参数S,从小到大依次为β-actin(0.203)<TDH3(0.250)<ALG9(0.538)<PDA1(0.557)<TAF10(0.856),与Ge Norm软件分析结果相符,因此β-actin可用作分析重金属镍胁迫下酿酒酵母相关基因表达的内参基因.本研究为镍胁迫下酿酒酵母细胞内基因表达的实时荧光定量PCR分析奠定基础.

• 单位
  内蒙古科技大学