长链非编码RNA RP1-90L14.1对前列腺癌LNCaP细胞生物学行为的影响及其机制研究

作者：吴品庚; 张宇曦^*; 张哲; 孔垂泽

来源：中华男科学杂志, 2019, 25(03): 209-215.

DOI：10.13263/j.cnki.nja.2019.03.003

• 前列腺癌
• 长链非编码RNA
• RP1-90L14.1
• LNCaP细胞
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的:研究长链非编码RNA(lncRNA) RP1-90L14.1对前列腺癌LNCaP细胞增殖、迁移、侵袭的作用以及对GRIN2A、BACE2基因表达的影响。方法:采用RT-PCR检测前列腺癌LNCaP、LNCaP-AI细胞中RP1-90L14.1的表达水平;在LNCaP细胞中瞬时转染RP1-90L14.1过表达质粒和载体质粒,即转染RP1-90L14.1实验组(LNCaP-RP1-90L14.1组)和转染阴性对照组(LNCaP-NC组);采用普通培养液和活性炭吸附无酚红培养液培养两组细胞;CCK-8法、Transwell法检测两组细胞增殖、迁移、侵袭能力;RT-PCR和Western印迹检测两组细胞中N-甲基-D-天氡氨酸离子型谷氨酸受体2A(GRIN2A)、β位点淀粉样前体蛋白裂解酶2 (BACE2) mRNA和蛋白表达含量变化。结果:RP1-90L14.1在LNCaP-AI中的表达量显著高于LNCaP细胞(8.49±0.43 vs 2.53±0.95,P<0.05)。转染RP1-90L14.1后,LNCaP-RP1-90L14.1组RP1-90L14.1表达量显著高于LNCaP-NC组(0.71±0.22 vs 0.02±0.01,P<0.05);在普通培养液和活性炭吸附无酚红培养液中,培养72 h时,LNCaP-RP1-90L14.1组细胞活性分别高出LNCaP-NC组51.95%(1.22±0.08 vs 0.08±0.05,P<0.05)和50.69%(0.79±0.02 vs 0.53±0.05,P<0.05);培养96 h时,LNCaP-RP1-90L14.1组分别高出LNCaP-NC组51.72%(1.72±0.07 vs 1.13±0.05,P<0.05)和60.23%(1.18±0.05 vs 0.73±0.08,P<0.05)。转染RP1-90L14.1后,在普通培养液和活性炭吸附无酚红培养液中,细胞迁移能力LNCaP-RP1-90L14.1组均显著高于LNCaP-NC组[(682.0±42.7)个vs(422.0±37.1)个,(419.0±42.9)个vs(251.0±25.9)个,P<0.05];细胞侵袭能力LNCaP-RP1-90L14.1组也均显著高于LNCaP-NC组[(507.0±22.2)个vs(274.0±19.6)个,(352.0±14.1)个vs(216.0±14.3)个,P<0.05]。LNCaP-RP1-90L14.1组与LNCaP-NC组相比,GRIN2A mRNA和蛋白表达量(5.13±0.89、2.09±0.54,5.88±0.29、2.03±0.22),BACE2 mRNA和蛋白表达量(5.82±0.50、2.53±0.30,4.89±0.19、3.37±0.13)均有统计学差异(P<0.05)。结论:lncRNA RP1-90L14.1可能在调控前列腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭行为中起重要作用;RP1-90L14.1能促进GRIN2A、BACE2的表达;RP1-90L14.1与GRIN2A、BACE2可能存在内源性竞争关系。

• 单位
  中国医科大学附属第一医院