茶多酚EGCG通过调控miR-16-5p/含铜胺氧化酶1轴发挥对过氧化氢诱导的人心肌细胞凋亡的保护作用

作者：毕樱馨; 刘咸筠; 孟祥龙; 柳越; 王梦媛; 张妍; 李占东; 殷玉和; 李皓^*

来源：食品工业科技, 2022, 43(07): 376-383.

DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2021080256

• 表没食子儿茶素没食子酸酯
• 人心肌细胞
• miR-16-5p
• AOC1
• 细胞凋亡
• H2O2

目的：探究茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对过氧化氢(H2O2)诱导人心肌细胞HCM凋亡的保护作用中的分子机制。方法：利用H2O2建立HCM细胞凋亡模型；通过caspase-3活性检测实验评价细胞凋亡水平；利用CCK-8法检测药物的细胞毒性；qPCR和Western blot用于检测含铜胺氧化酶1(AOC1)和miR-16-5p的表达水平；通过细胞转染调控AOC1和miR-16-5p在HCM细胞中的表达；通过TargetScan预测以及双荧光素酶报告基因实验验证miR-16-5p和AOC1 mRNA 3’UTR区的结合关系以及结合位点。结果：EGCG处理后可以显著抑制H2O2诱导的HCM细胞凋亡(P<0.05)；在凋亡细胞中，AOC1表达显著下降，EGCG可以显著上调AOC1的表达，而敲减AOC1显著逆转EGCG对凋亡的抑制(P<0.05)；同时，在凋亡细胞中，miR-16-5p表达显著上升，EGCG可以显著抑制miR-16-5p的表达，而上调miR-16-5p显著逆转了EGCG对凋亡的抑制(P<0.05)；上调miR-16-5p显著逆转了EGCG对凋亡细胞中AOC1表达的促进；最后，miR-16-5p可以靶向抑制AOC1的表达，而过表达AOC1显著逆转了miR-16-5p诱导的HCM细胞凋亡。结论：EGCG通过调控miR-16-5p/AOC1轴发挥了对H2O2诱导HCM细胞凋亡的保护作用，同时提示AOC1是保护心肌细胞损伤治疗的潜在新靶点。

• 单位
  生命科学学院; 吉林工程技术师范学院; 吉林大学第一医院; 长春工业大学