摘要

类泛素蛋白SUMO (small ubiquitin-related modifier)偶联酶E2在生物机体中只发现一种,即泛素偶联酶9 (ubiquitin-conjugating enzyme 9, Ubc-9)。在已知的所有生物体中,Ubc-9具有高度保守性。本研究首先通过qRT-PCR技术检测布鲁氏菌(Brucella ovis) 16M侵染小鼠(Mus musculus)巨噬细胞RAW264.7不同时间的Ubc-9转录水平;然后通过慢病毒包装技术构建Ubc-9基因沉默的小鼠巨噬细胞系模型;最后利用流式细胞术分析Ubc-9基因沉默对布鲁氏菌诱导小鼠巨噬细胞凋亡的影响,并检测胞内载菌量。结果表明,布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞8 h,细胞内Ubc-9转录水平显著高于对照组细胞(P<0.05);经慢病毒包装系统构建的Ubc-9基因沉默的小鼠巨噬细胞中,Ubc-9基因转录被显著抑制,布鲁氏菌感染诱导的细胞凋亡率显著降低(P<0.05),胞内载菌量高于对照组(P<0.05)。本研究为深入探讨布鲁氏菌在巨噬细胞内的存活机制提供了基础资料。