基于布鲁氏菌Dps蛋白间接ELISA检测方法的建立与初步应用

作者：孙天浩; 关飞虎; 张倩; 李楠; 张博; 苗玉和; **^*; 陈创夫^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(02): 143-151.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0020

• 布鲁氏菌
• Dps蛋白
• 原核表达
• 间接ELISA

为建立一种布鲁氏菌病早期快速诊断的血清学方法，进一步加强对布鲁氏菌病的防控。对布鲁氏菌Dps蛋白进行生物信息学分析、原核表达，将纯化后的重组蛋白作为包被抗原，建立了布鲁氏菌病血清学间接ELISA检测方法并进行初步应用。结果显示，当重组蛋白Dps包被量为0.25μg,5%脱脂奶粉溶液封闭1.5 h，用稀释度为1∶1 000的一抗孵育1 h，稀释度为1∶5 000的二抗孵育0.5 h，显色20 min时建立的间接ELISA方法条件最优，该方法的临界值D450为0.694，与凝集试验的总符合率达到91.1%(82/90)，同时具有较好的特异性和重复性。应用本方法对新疆伊犁地区2个羊场的308份血清进行检测，布鲁氏菌抗体阳性率为2.27%(7/308)。结果表明，本研究建立了特异性高、重复性好的血清学间接ELISA检测方法，为布鲁氏菌病的诊断和流行病学调查提供了参考。

• 单位
  动物科技学院; 石河子大学; 新疆农垦科学院