6-生物素氨基己酸-七叶亭合成及其生物活性评价

作者：王佳茂; 韦永华; 卢易扬; 李美芽; 王林燕; 应佳妮; 蒋福升^*

来源：浙江中医药大学学报, 2022, 46(07): 708-715.

DOI：10.16466/j.issn1005-5509.2022.07.002

• 七叶亭
• 生物素化
• 化学合成
• 结构鉴定
• 抗氧化
• 抗炎

[目的]优化6-生物素氨基己酸-七叶亭（6-biotinamidohexanoic acid-esculetin,Bio-AHA-ESC）制备工艺，并初步评价其生物学活性。[方法]以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐[1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDCI]和N,N’-二环己基碳化二亚胺（N,N’-dicyclohexyl carbodiimide,DCC）为偶联催化剂，通过考察反应温度、时间、EDCI用量、4-二甲氨基吡啶（4-dimethylaminopyridine,DMAP）用量和七叶亭（esculetin,ESC）与6-生物素氨基己酸（6-biotinamidohexanoic acid,Bio-AHA）投料比，优化合成制备工艺；采用半制备液相色谱法对产物进行分离、纯化，并通过紫外光谱、高分辨质谱和核磁氢谱进行结构鉴定。最后对其氧化应激损伤保护作用和抗炎活性进行初步评价。[结果] EDCI是较为理想的催化剂，优化反应条件为：ESC与Bio-AHA摩尔比为2:1,DMAP添加量为EDCI摩尔数的十分之一，干燥N,N-二甲基甲酰胺（N,N-dimethylformamide,DMF）溶解，室温搅拌反应6 h。经鉴定产物为Bio-AHA-6-位羟基衍生化ESC，该产物在20.00～80.00μmol·L-1剂量范围内均可剂量依赖性抑制过氧化氢诱导的人肝癌细胞HepG2损伤和脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)分泌，尤其在80.00μmol·L-1时其与ESC生物学活性差异无统计学意义（P>0.05）。[结论]本研究建立了一种温和、高效、专一，而且易于纯化的Bio-AHA-ESC制备方法，所得产物较好保持了ESC生物活性，为下一步深入探究中药活性单体ESC结合靶蛋白奠定了良好基础。

• 单位
  生命科学学院; 浙江中医药大学; 第一临床医学院