摘要
目的:探究GDF11在人牙髓干细胞(hDPSCs)矿化过程中的作用及潜在机制。方法:收集拔除的25岁以下患者第三磨牙组织,用成骨培养基诱导培养原代hDPSCs,对传代培养的细胞进行流式细胞术hPDSCs鉴定。用RNA干扰技术对hDPSCs进行生长分化因子11(GDF11)基因敲减实验。免疫荧光染色用于验证hDPSCs中GDF11的表达和分布,商业试剂盒用于检测hDPSCs牙源性分化和矿化能力;qRT-PCR用于检测牙本质相关标志物(牙本质唾液酸磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)和Ⅰ型胶原α1链(COL1a1))的表达水平;Western Blot用于检测PI3K/AKT信号通路中相关蛋白分子的蛋白磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR))表达水平。结果:GDF11在hDPSCs中表达主要分布在细胞质中,敲减GDF11后可减弱牙源性分化和矿化能力(P<0.05),导致牙本质标志物相关基因DSPP、OCN和COL1a1的转录水平显着下调(P<0.05),并下调PI3K/AKT信号通路中相关蛋白分子的蛋白p-AKT和p-mTOR表达(P<0.05)。结论:GDF11通过PI3K/AKT信号通路正向调节h DPSCs的牙源性分化和矿化。
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单位郑州市中心医院