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摘要
以香菇（Lentinula edodes)为材料，对谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GPX）进行基因的鉴定、编码序列克隆、蛋白生物信息学分析以及基因表达模式分析。结果表明：成功鉴定并克隆1个LeGPX基因，该基因开放阅读框（Open reading frame,ORF）621 bp，所编码蛋白包含206个氨基酸残基；系统发育分析显示LeGPX蛋白与小皮伞（Marasmius fiardii）和灰色果腐菌（Moniliophthora roreri）的GPX亲缘关系较近，同源比对结果显示LeGPX蛋白包含GPX特征序列和催化位点。生物信息学分析表明：LeGPX为亲水性不稳定蛋白，蛋白分子质量22.81 kD，理论等电点8.83；二级结构以无规则卷曲为主，不含信号肽和跨膜结构。通过原核表达和纯化成功获得了LeGPX可溶性蛋白，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）显示蛋白大小符合预期。荧光定量PCR分析表明，香菇褐变发生过程中LeGPX基因表达量快速上升，并且与菌盖相比，Le GPX在香菇菌柄部位表达更为活跃。
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