摘要
背景:目前骨髓间充质干细胞已在软骨损伤治疗中取得了显著成效,但与其相比,鼻黏膜间充质干细胞移植具有更多优势,例如取材方便患者更易接受、可安全活检不损伤嗅觉。目的:探索骨髓间充质干细胞和鼻黏膜间充质干细胞在转化生长因子β3作用下的成软骨诱导效果差异。方法:体外分离培养SD大鼠鼻黏膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞,用含有转化生长因子β3的成软骨诱导分化培养基分别进行成软骨诱导,相应的对照组用不含有转化生长因子β3的成软骨诱导分化培养基培养。在第7,14天行整体结构观察,并提取细胞RNA与蛋白,采用RT-PCR和Western blot检测软骨细胞相关COL2A1、SOX-9、Aggrecan的表达。结果与结论:(1)经过7 d成软骨诱导后骨髓间充质干细胞和鼻黏膜间充质干细胞均能形成半透明膜片结构,离心后成团吹打难以分散;(2)与对照组相比,加入转化生长因子β3成软骨诱导分化后COL2A1、Aggrecan mRNA表达均显著上调(P <0.01),其中鼻黏膜间充质干细胞组的COL2A1、Aggrecan mRNA表达高于骨髓间充质干细胞组(P <0.01);干预7 d,骨髓间充质干细胞实验组中SOX-9 mRNA表达与其对照组无明显差异(P> 0.05),而在鼻黏膜间充质干细胞实验组中SOX-9 mRNA表达较其对照组显著增高(P <0.01);(3)与对照组相比,加入转化生长因子β3成软骨诱导分化后COL2A1、SOX-9蛋白表达均显著上调(P <0.01);干预14 d,骨髓间充质干细胞实验组的COL2A1蛋白表达高于鼻黏膜间充质干细胞实验组,差异有显著性意义(P <0.01);干预7,14 d,鼻黏膜间充质干细胞实验组的SOX-9蛋白表达高于骨髓间充质干细胞实验组,差异有显著性意义(P <0.01);(4)结果表明,转化生长因子β3对鼻黏膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞均有成软骨的刺激作用,鼻黏膜间充质干细胞也是未来软骨修复策略的潜在候选者。
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单位江苏大学附属医院