摘要
目的测试在加力状态下,层层自组装BMP-2控释涂层的缓释效果,并检测其对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)的成骨诱导作用。方法通过层层自组装技术在Flexcell加力六孔板上负载[(PAH/BMP-2)/PSS][COL/ALG]2 0涂层,利用ELISA检测加力状态下缓释涂层21 d内释放的BMP-2浓度;将46代PDLSCs种于预置BMP-2控释涂层的Bio Flex专用六孔培养板,置于FX-4000T加力系统中,加载动态张应力(10%形变牵张力,20 Hz),各组作用时间均为1 h/次,3次/d,间隔4 h加力,分别培养3、5、7 d。对照组为非预置涂层添加BMP-2培养液(100 ng/ml)的Bio Flex板同条件下加力培养;使用用Real-Time PCR和Western印迹法分析PDLSCs在不同张应力作用前后,其表型标志Runx2,ALP和OCN在m RNA和蛋白水平的表达变化情况。结果实验结果显示,与对照组相比,实验组加力3、5、7 d后,Runx2、ALP和OCN标志物m RNA与蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论 [(PAH/BMP-2)PSS]/[COL/ALG]20涂层对h PDLSCs在加力状态下成骨向分化能力具有显著增强作用。
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单位上海市口腔病防治院; 同济大学附属口腔医院