Neuralized siRNA表达载体的构建及鉴定

作者:朱美意; 单莉娅; 郑艳; 郝慧鑫; 黄瑾
来源:基础医学与临床, 2013, (07): 898-903.
DOI:10.16352/j.issn.1001-6325.2013.07.008

摘要

目的构建Neuralized siRNA干扰载体并观察其对细胞中Neuralized表达水平的影响。方法化学合成靶向Neuralized的短发夹寡核苷酸序列,与线性化pGPU6/Neo质粒退火连接。酶切后测序鉴定正确,转染入HEK293细胞。利用Western blot和间接免疫荧光技术分析Neuralized siRNA载体对细胞中Neuralized表达及其定位的影响。结果 Neuralized siRNA干扰载体经酶切及测序分析表明,目的核苷酸序列成功插入预计位点且序列正确;Neuralized siRNA干扰载体转染HEK293细胞后,Western blot检测显示,Neuraliz...

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