升清胶囊有效组分对氧化损伤肝细胞CYP7A1及SCP2的影响

作者：李阳; 张静喆; 顾宏刚^*

来源：辽宁中医杂志, 2023, 50(08): 188-257.

DOI：10.13192/j.issn.1000-1719.2023.08.051

• 氧化损伤
• 胆固醇结石
• 升清胶囊
• 胆固醇7α-羟化酶
• 固醇携带蛋白2

目的 观察升清胶囊有效组分对过氧化氢(H2O2)诱导的人肝细胞LO2的氧化损伤模型中胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)和固醇携带蛋白2(SCP2)mRNA及蛋白表达的影响。方法 将正常人LO2肝细胞分为正常组、模型组、对照组(维生素E)及治疗组(升清胶囊有效组分)。模型组、对照组及治疗组选用H2O2诱导人肝细胞LO2氧化损伤模型；通过检测细胞外乳酸脱氢酶(LDH)和细胞内谷胱甘肽(GSH)来分析各组对H2O2造成人肝细胞的氧化损伤的影响；治疗组、对照组每孔分别加入2000μL含有升清胶囊有效组分、维生素E的RPMI-1640培养液，正常组和模型组加入等体积的RPMI-1640培养液，培养24 h。采用实时荧光定量PCR和Western Blot检测CYP7A1和SCP2的mRNA和蛋白表达。结果 (1)相对于模型组，治疗组、对照组LDH含量下降(P<0.05),GSH含量明显升高(P<0.01);相对于对照组，治疗组LDH含量下降(P<0.05),GSH含量稍上升(P>0.05)。(2)在实时荧光定量PCR中，相对于模型组(100%),正常组、治疗组和对照组肝细胞CYP7A1 mRNA的表达上调(分别为296.16%、242.65%、126.61%),相对于对照组(100%),治疗组肝细胞CYP7A1 mRNA的表达上调(为191.65%);相对于模型组(100%),正常组、治疗组和对照组肝细胞SCP2 mRNA的表达下调(分别为15.40%、33.41%、39.94%),相对于对照组(100%),治疗组肝细胞SCP2 mRNA的表达下调(为83.66%)。(3)Western Blot检测中，正常组、治疗组和对照组肝细胞CYP7A1蛋白表达均明显高于模型组(P<0.01),治疗组CYP7A1蛋白表达稍高于对照组，差异无统计学意义(P>0.05);正常组肝细胞SCP2蛋白表达明显低于模型组(P<0.01),治疗组、对照组SCP2蛋白表达低于模型组(P<0.05),治疗组略微低于对照组，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 升清胶囊有效组分可以降低肝细胞的氧化损伤，修复肝细胞内胆固醇的正常代谢，提高CYP7A1 mRNA和蛋白量的表达，降低SCP2 mRNA和蛋白量的表达，减少成石性胆汁的形成，其作用与维生素E相当。

• 单位
  郑州人民医院; 上海中医药大学附属龙华医院; 河南中医药大学