基于串联杂合泛素结合结构域探针的多聚泛素化信号免疫组织化学检测技术研究

作者：黄帅; 肖伟弟; 李衍常^*; 徐平^*

来源：军事医学, 2023, 47(03): 205-209.

• 甲醛固定石蜡包埋切片
• 抗原修复
• 多聚泛素化信号检测
• 免疫组织化学
• 串联杂合泛素结合结构域探针

目的 提高串联杂合泛素结合结构域（ThUBD）探针检测甲醛固定石蜡包埋（FFPE）切片中多聚泛素化信号的灵敏度。方法 利用微波炉加热方法，采用不同盐离子种类和pH缓冲液进行抗原修复，在有无高浓度还原剂条件下，用ThUBD探针检测FFPE切片中的多聚泛素化信号。结果 在pH 9.5 EDTA缓冲液条件下，加入50 mmol/L DTT可检测到FFPE切片中明显的多聚泛素化信号。结论 pH 9.5 EDTA缓冲液中加50 mmol/L DTT有利于多聚泛素链的暴露与复原，显著提升ThUBD探针用于免疫组织化学检测的灵敏度。

• 单位
  蛋白质组学国家重点实验室