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摘要
通过合成羧基化孔雀石绿,采用活泼酯法制备孔雀石绿免疫抗原CMG-BSA、检测抗原CMG-OVA。采用CMG-BSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化获得了一株稳定的抗孔雀石绿单克隆抗体,并建立了检测孔雀石绿的直接竞争ELISA方法。ELISA方法的最佳操作参数:孔雀石绿抗体稀释倍数1:16000(1mg/ml),酶标抗原(CMG-HRP)使用质量浓度0.2μg/ml。该方法具有良好的灵敏度和特异性,IC50值0.3ng/ml,最低检测灵敏度达到0.05ng/ml,标准曲线方程为y=-20.888x+81.423(R2=0.9813)。
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单位南昌大学食品科学与技术国家重点实验室; 生命科学学院; 江西师范大学; 无锡中德伯尔生物技术有限公司
