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摘要
目的 探讨JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490对M2样巨噬细胞功能表型的调控作用，以及对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 采用佛波酯(PMA)体外诱导人单核细胞系THP-1分化为M0型巨噬细胞，分别用脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)诱导为M1样表型，IL-4和IL-13诱导为M2样表型，并应用免疫荧光标记CD68、CD86和CD206鉴定。RT-qPCR检测巨噬细胞的CD163、Arg1、CCL22、PPARγ、IL-10、IL-20和TNF-α的mRNA表达。Western blotting检测JAK2/STAT3信号通路关键蛋白表达。JAK2/STAT3抑制剂AG490处理M2样巨噬细胞，检测M2表型的标志基因。分别将巨噬细胞与胃癌细胞共培养，通过CCK-8法、划痕实验、Transwell小室基质胶侵袭实验及流式细胞术检测巨噬细胞对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。制备裸鼠MKN45胃癌异种皮下移植瘤模型，造模后连续20 d观察肿瘤大小及质量。结果 AG490处理的M2样巨噬细胞时，P38MAPK、JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著降低，Arg1、CCL22、PPARγ、IL-10的mRNA表达显著降低。M2样巨噬细胞与胃癌细胞共培养可以促进胃癌细胞活力，增加迁移侵袭能力，并抑制凋亡。而AG490处理组M2样巨噬细胞与胃癌细胞共培养时，MKN-45细胞和MGC823的增殖活力显著低于M2组(1.047±0.062 vs. 1.426±0.076,1.149±0.006 vs. 1.301±0.015);与M2组相比，AG490处理组的MGC823胃癌细胞迁移能力[(100.0±5.73)%vs.(72.0±3.85)%]和侵袭能力[(100.0±7.40)%vs.(60.0±6.54)%]显著降低。AG490处理组的MGC823细胞凋亡率较M2组显著增高[(27.51±0.70)%vs.(20.82±0.92)%]。在裸鼠异种移植瘤模型中，第20天的AG490处理组移植瘤体积和质量显著低于M2组[(736.04±182.34)mm3vs.(1 080.5±250.57)mm3,(0.64±0.11)g vs.(0.87±0.17)g]。结论 AG490抑制M2样巨噬细胞JAK2/STAT3通路，部分逆转M2样巨噬细胞极化及其促癌功能，可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭，诱导凋亡。JAK2/STAT3通路可作为胃癌治疗的潜在靶点进行深入研究。
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单位福建医科大学附属第一医院
