丹酚酸B激活自噬改善高磷诱导血管平滑肌细胞钙化的机制研究

作者：林评兰; 吴明; 杨枫; 徐琳; 黄迪; 裘福荣; 叶朝阳^*

来源：中国医院药学杂志, 2022, 42(12): 1192-1196.

DOI：10.13286/j.1001-5213.2022.12.03

• 胸主动脉血管平滑肌细胞
• 血管钙化
• 丹酚酸B
• 自噬

目的:探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,SAB)改善高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)钙化的作用及机制。方法:采用大鼠血管平滑肌细胞(A7r5)钙化体外模型，用细胞增殖与活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测SAB对细胞活力的影响；2.6μmol·g~(-1)高磷诱导VSMCs钙化，加入丹参多酚酸类化合物丹酚酸B、丹酚酸C(Salvianolic acid C,SAC)、迷迭香酸(Rosmarinic acid, RA)及细胞自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine, 3-MA,5 nmol·g~(-1)),采用邻甲酚酞络合铜法及茜素红S染色检测细胞钙化程度；Western blot检测VSMCs钙化指标Runx2、OPN,自噬相关蛋白Beclin-1和LC3II/LC3I以及平滑肌收缩表型蛋白Calponin、SM22α的表达。结果:(1)钙离子浓度定量实验及茜素红染色实验显示SAB显著减轻高磷诱导的VSMCs钙化；(2)SAB浓度小于100 nmol·g~(-1)以下时对VSMCs生存活力无明显影响，选择3,10,30 nmol·g~(-1)剂量进行后续实验；Western blot显示SAB明显降低VSMCs成骨样分化的分子标志物Runx2、OPN蛋白表达(P<0.05),上调自噬标志物Beclin-1、LC3-I/II及VSMCs收缩表型标志物Calponin、SM22蛋白表达(P<0.05)。(3)SAB减轻高磷诱导VSMCs钙化的作用被自噬抑制剂3-MA阻断。结论:SAB可通过激活自噬抑制VSMCs钙化及向成骨样表型转化。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院; 上海中医药大学