治疗用乙型肝炎腺病毒注射液TC007食蟹猴免疫原性、免疫毒性和生物分布研究

作者：窦德虎; 李建祥^*; 张雪峰

来源：药物评价研究, 2018, 41(10): 1810-1815.

• 治疗用乙型肝炎腺病毒注射液
• 腺病毒
• 食蟹猴
• 免疫原性
• 免疫毒性
• 生物分布

目的重复给予食蟹猴治疗用乙型肝炎腺病毒注射液(TC007),观察其免疫原性、免疫毒性、生物分布。方法普通级食蟹猴随机分为溶媒对照组,TC007低、中、高剂量(1.0×109、1.0×1010、1.0×1011 VP/只)组,Ad5-Null(1.0×1011 VP/只,空载对照)组,每组10只,背部肩胛区sc给药,每周给药1次,共7次,停药恢复28 d。应用流式细胞仪进行外周血中淋巴细胞分群检测,检测经TC007刺激后分泌干扰素-γ(IFN-γ)的特异T细胞水平;免疫组化检测肝脏IFN-γ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)表达;试剂盒法测定血清中抗Ad5抗体的中和活性,补体成分C3、C4及免疫复合物(CIC)水平;给药期及恢复期结束,进行多个组织取材,HE染色后进行病理学阅片,TaqMan探针qPCR法进行Ad5分布检测。结果与溶媒对照组比较,各组动物血浆中CD3+CD8+T细胞、CD4+/CD8+、CD3-CD56+NK细胞、CD3+CD56+NKT细胞、巨噬细胞CD45+CD14+百分率均未见明显异常;Ad5-Null组特异T细胞均未见明显改变,TC007各剂量组针对HBV 3种抗原(Core、Env、Pol)分泌IFN-γ的特异性T细胞水平显著增加(P<0.05、0.01),停药恢复末期(d68),效应值仍略高;TC007各剂量组和Ad5-Null组食蟹猴肝脏组织中IFN-γ、TNF-α、IL-2均高于溶媒对照组,且呈剂量相关性,但TC007各剂量组与Ad5-Null组比较未见明显差异;TC007各剂量、Ad5-Null组动物均产生抗Ad5抗体,39/40例具有中和活性;TC007各剂量组补体C3、C4未见明显异常,高剂量组CIC轻微升高(P<0.05)。Ad5主要分布于给药局部,在腋下淋巴结有少量分布,其他组织未见分布。TC007及Ad5-Null组均可见给药局部轻微至轻度皮下组织炎性细胞浸润,停药恢复28 d,病变可见明显恢复,其他组织未见病理学改变。结论TC007在食蟹猴体内具有一定免疫原性,抗Ad5抗体具有中和活性,高剂量组可见轻微免疫复合物形成,未见免疫器官损伤,生物分布主要集中于给药部位,可产生特异性T细胞。

• 单位
  公共卫生学院; 苏州大学