摘要
目的:探讨通痹健骨方水提物对脂多糖(LPS)诱导人软骨细胞的影响及作用机制。方法:提取人软骨细胞及传代培养,采用甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光染色法对细胞进行鉴定,LPS诱导软骨细胞模拟膝骨关节炎(KOA)软骨细胞模型,设对照组,模型组,通痹健骨方低、中、高剂量组,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10、IL-1β的水平;Western Blot、qRT-PCR法检测肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、泛素结合蛋白P62(P62)蛋白及mRNA表达情况。结果:提取的细胞符合软骨细胞特征。与模型组比较,通痹健骨方中剂量组TNF-α、IL-1β、P62蛋白及mRNA显著降低(P<0.05,P<0.01),IL-10含量和LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白及mRNA的表达均显著升高(P<0.01)。结论:通痹健骨方水提物可通过调节软骨细胞自噬,提高软骨细胞的抗应激能力和生存能力,抑制炎症反应,可能是通痹健骨方治疗KOA的机制之一。
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