沉默HDGF基因抑制HepG2细胞的增殖和脂质代谢

作者：闵雪洁; 文君; 赵丽; 刘建军; 黄钢; 赵小平^*

来源：现代生物医学进展, 2018, 18(11): 2006-2011.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2018.11.002

• 肝癌衍生生长因子
• 脂质代谢
• 增殖
• HepG2细胞

目的:探讨肝癌衍生生长因子(HDGF)对HepG2细胞增殖和脂质代谢的影响。方法:用脂质体包裹si RNA的方法沉默HDGF基因,用实时荧光定量PCR法和蛋白质免疫印迹法检测HDGF在mRNA和蛋白水平的变化,检测细胞总甘油三酯、胆固醇含量并用油红O染色,CCK-8检测及琼脂糖凝胶克隆形成,实时荧光定量PCR法检测脂质代谢相关酶的mRNA表达。结果:将靶向HDGF小干扰(si RNA-HDGF)转染到HepG2细胞后,可明显抑制HDGF的mRNA表达(P<0.001)和蛋白表达。HDGF蛋白抑制后,细胞增殖在48 h(P<0.01)、72 h(P<0.001)和96 h(P<0.001)均明显降低;细胞内总甘油三酯及胆固醇水平也明显降低(P<0.05,P<0.01)。此外,油红O染色显示细胞内脂滴有明显的减少。脂质代谢相关酶脂肪酸合成酶(FASN)、羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)及ATP-柠檬酸裂解酶(ACLY)的mRNA表达均明显降低(P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.01)。结论:抑制HDGF的表达可明显降低HepG2细胞内脂质代谢水平并抑制其增殖。

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院