摘要

目的探讨中药山绿茶中乌苏烷三萜类化合物3β,19α-二羟基乌苏-12-烯-23,28-二羧酸(Rotundioic acid,RA)对肝癌细胞株HepG2细胞周期、凋亡的影响及其作用机制。方法人肝癌细胞株HepG2以RA(15,30,60,90mg.ml-1)作用不同的时间后,分别使用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT),吖啶橙(AO)荧光染色法,免疫细胞化学SP法,流式细胞术等实验方法检测HepG2细胞的增殖抑制情况、细胞周期和凋亡的形态学变化,以及细胞内半胱天冬酶-3(Caspase-3)、半胱天冬酶-9(Caspase-9)两个重要的细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果 RA对HepG2细胞有增殖抑制作用,其作用随着药物浓度和作用时间的增加而增强。RA作用24 h后HepG2细胞周期的主要特点是大量细胞累积于G1期,进入S期的细胞减少,RA能够诱导HepG2细胞凋亡,RA(30,60,90 mg.ml-1)经过24 h作用后,细胞凋亡率为8.19%,8.67%,9.81%,细胞内Caspase-3蛋白的表达随着药物浓度增加逐渐增加;Caspase-9的表达随着药物浓度增加无明显变化。结论 RA能够抑制HepG2细胞的增殖,并使细胞大量累积于G1期,进入S期的细胞减少;Caspase-3蛋白的表达增加来诱导细胞凋亡。