日本血吸虫重组两歧双歧杆菌疫苗的构建及其表达

作者：罗广旭; 李文桂; 覃婷

来源：中华地方病学杂志, 2017, 36(04): 257-260.

• 血吸虫,日本
• 融合基因
• 两歧双歧杆菌
• 疫苗

目的构建及鉴定日本血吸虫(Sj)重组两歧双歧杆菌(Bb)疫苗[Bb(pGEX-Sj26GST-Sj14-3-3)],并研究融合基因Sj26GST-Sj14-3-3在Bb中的表达情况。方法将重组质粒pGEX-Sj26GST-Sj14-3-3电转化至Bb中,构建重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj14-3-3)疫苗,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。采用双酶切和聚合酶链式反应(PCR)鉴定重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj14-3-3)疫苗,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白免疫印迹法对表达产物进行鉴定。结果双酶切及PCR证实重组质粒pGEX-Sj26GSTSj14-3-3成功转入Bb中。SDS-PAGE鉴定结果显示,诱导表达产物是相对分子质量约为67×103的重组蛋白,与预期结果相符。蛋白免疫印迹法鉴定结果显示,重组蛋白能被Sj感染的兔血清所识别。结论成功构建Sj重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj14-3-3)疫苗,Bb可表达具有特异抗原性的Sj26GST-Sj14-3-3重组蛋白。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院