摘要
SlBAG9是番茄中一种Bcl-2相关抗凋亡基因(Bcl-2 associated athanogene, BAG),调控植物耐高温性,并且能够响应多种环境胁迫因子。为了进一步探究SlBAG9基因的调控模式,本研究进行了SlBAG9上游启动子分析。根据番茄基因组数据,克隆SlBAG9基因上游1 500 bp(实际1 486 bp)启动子序列。通过PlantCARE工具预测发现该区域有多个逆境胁迫相关的顺式作用调节元件,包括一个热休克元件(HSE1)。根据元件的分布,分别扩增得到长度为986、386、239、113 bp的4个启动子5′端缺失片段。将克隆的启动子全长和缺失序列定向替换pBI-121载体的CaMV35S启动子,分别构建SlBAG9的不同序列启动子与GUS基因的融合表达载体,并通过农杆菌介导瞬时转化本氏烟草叶片。通过GUS 组织化学染色发现SlBAG9基因启动子可以驱动下游GUS基因的表达,产生GUS活性。对启动子进行高温应答分析, 结果表明高温能够激活GUS活性且HSE1元件的缺失影响了高温激活的GUS活性。本研究结果为阐明SlBAG9基因参与高温胁迫应答及启动子转录作用机理研究提供理论依据。
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