高通量荧光PCR组合方法鉴定16种金黄色葡萄球菌肠毒素的方法建立及评估

作者：左乐; 姜尹祥; 石晓路; 邱亚群; 林一曼; 江敏; 扈庆华^*

来源：疾病监测, 2018, 33(09): 753-757.

DOI：10.3784/j.issn.1003-9961.2018.09.012

• 金黄色葡萄球菌肠毒素
• 荧光PCR
• 荧光探针熔解曲线方法

目的建立一种高效、特异的荧光探针熔解曲线方法,用于鉴定16种金黄色葡萄球菌肠毒素。方法根据金黄色葡萄球菌肠毒素SEA～SEQ特异基因序列设计不同杂交连接探针,建立金黄色葡萄球菌肠毒素检测体系,评估其最低检出限、特异度、可重复性等指标。与普通PCR方法比较,采用荧光探针熔解曲线方法对本实验室的158株食物中毒金黄色葡萄球菌进行检测,评估新方法的灵敏度和特异度。结果荧光探针熔解曲线方法最低检出限为0.80～2.15 ng/μl,特异度为100.0%,无交叉荧光信号产生,变异系数<1%。与普通PCR方法比较,新方法的灵敏度为95.4%,特异度为100.0%,Kappa值为0.88。结论荧光探针熔解曲线技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法可覆盖金黄色葡萄球菌16种肠毒素,具有快速、准确、特异性高的特点。

• 单位
  深圳市疾病预防控制中心; 深圳大学