空肠弯曲菌表面蛋白特异性多表位抗原的设计、表达与鉴定

作者：欧瑜; 鄢方兵; 唐泰山; 祝长青; 蒋原; 张常印

来源：药物生物技术, 2012, (02): 117-120.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.2012.02.006

• 空肠弯曲菌
• 多表位抗原
• 原核表达 Campylobacter jejuni
• Multi-epitope antigen
• Prokaryotic expression

构建空肠弯曲菌表面蛋白特异性多表位抗原原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达,免疫动物后检测其抗血清与空肠弯曲菌菌体的反应性。从空肠弯曲菌的6个表面蛋白中分析到特异性抗原表位,人工合成其串联基因片段,将其插入原核表达载体,获得重组质粒pET-32a(+)-CJMEA-A,经IPTG诱导后表达出25k的目标蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,Western blot和间接ELISA检测重组蛋白抗原性和抗血清反应性。结果表明目标蛋白具有良好的反应原和免疫原性,抗血清能与菌体发生反应。其抗体可用于C.jejuni免疫磁珠和免疫胶体金等检测方法的建立。

• 单位
  中国药科大学; 江苏出入境检验检疫局