盐酸可乐定人工抗原的合成及鼠源多抗血清 ELISA鉴定

作者：王耀; 曹金博; 李铁梅; 庞杏豪; 胡骁飞^*

来源：食品与机械, 2021, 37(07): 76-111.

DOI：10.13652/j.issn.1003-5788.2021.07.012

• 盐酸可乐定
• 人工抗原
• 多抗血清
• ELISA

目的:获得敏感性高,特异性强的新型瘦肉精盐酸可乐定(Clonidine hydrochloride, CLO)鼠源多抗血清。方法:以CLO的衍生物盐酸阿可乐定(Apraclonidine hydrochloride, ACLO)为半抗原,采用戊二醛法将ACLO分别与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin, BSA)和鸡卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)偶联,合成免疫抗原CLO-BSA和包被抗原CLO-OVA。采用紫外扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定其偶联效果后,免疫BALB/c小鼠,制备多抗血清。利用间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定其免疫学特性。结果:合成的人工抗原免疫效果较好,所获小鼠多抗血清效价均达到1∶12 800以上,其中3号小鼠敏感性最好,半数抑制质量浓度(IC50)为82.75 ng/mL,与其他几种常见的瘦肉精类药物的交叉反应率均小于0.9%,特异性良好。结论:通过戊二醛法成功合成了高免疫原性的CLO人工抗原,并获得敏感性高,特异性强的CLO鼠源多抗血清。

• 单位
  西北农林科技大学; 河南科技大学; 河南省农业科学院; 中国检验检疫科学研究院; 食品与生物工程学院