实时荧光聚合酶链反应检测新型冠状病毒室内质控方法初探

作者：刘晶; 杜晶辉; 刘瑞岩; 鲍志军; 贺鑫; 赵岩; 王俊; 雷曜荣; 刘旭^*

来源：国际检验医学杂志, 2023, 44(01): 74-78.

• 新型冠状病毒
• 室内质控
• Ct值
• 实时荧光聚合酶链反应

目的 绘制实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)定性室内质控图和基于循环阈值的Levey-Jennings质控图，探究新型冠状病毒RT-PCR检测的室内质控方法。方法 使用无菌生理盐水按照1∶5、1∶10、1∶20、1∶30、1∶40对第三方质控物进行倍比稀释，确定室内弱阳性质控的稀释倍数。统计该实验室2022年1-2月新型冠状病毒RT-PCR阴阳性质控原始记录，以自定义数值绘制定性结果散点图。统计2022年1-2月每批次弱阳性质控的靶基因Ct值，分别对N基因和ORF1ab基因两组Ct值进行正态分布检验，根据前20次检测结果分别计算N基因和ORF1ab基因的靶值X和标准差s,绘制Levey-Jennings质控图。结果 确定1∶30为每日室内质控的弱阳性质控品的稀释倍数。定性检测散点图可直观发现1次弱阳性质控检出阴性的“假阴性”反应。弱阳性质控N基因、ORF1ab基因Ct值均符合正态分布(P>0.05)。N基因Ct值靶值X为34.13,变异系数为1.91%,所有Ct值均在X±3s以内，5次出现±2s警告，符合Westgard质控规则。ORF1ab基因Ct值靶值为35.30,变异系数为2.58%,出现1次+3s失控，5次±2s警告，第31～41批次违反了10x规则，第73～80批次违反了R 4s规则。结论 应用定性室内质控散点图和Levey-Jennings质控图建立的新型冠状病毒室内质控方法具有可行性，能够有效监测和预警检测过程中的质量问题，保证检测结果准确可靠。

• 单位
  天津中医药大学第一附属医院