hSp17真核表达载体构建及其在卵巢癌细胞中的表达

作者：缪家文; 张海燕; 张春华; 李芳秋

来源：山东医药, 2011, (47): 1-3.

• 人精子蛋白17
• 卵巢肿瘤,卵巢癌
• 真核表达载体
• 免疫细胞化学 sperm protein 17
• ovarian tumor,ovarian cancer
• eukaryotic expression vector
• immunocytochemistry

目的构建人精子蛋白17(hSp17)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/hSp17,为其临床应用奠定基础。方法用PCR方法获取hSp17基因片段,NheⅠ、KpnⅠ双酶切、粘端连接的方法构建含有hSp17基因的pcD-NA3.1(+)/hSp17真核表达载体。将该载体行脂质体介导转染卵巢癌细胞HO8910,免疫细胞化学方法检测转染细胞hSp17蛋白表达,G418筛选稳定表达hSp17蛋白的细胞株。结果酶切和测序结果均证实pcDNA3.1(+)/hSp17重组质粒的构建完全正确。免疫细胞化学方法证实外源性hSp17基因能够在卵巢癌HO8910细胞瞬时表达。经G418连续筛选,得到阳性克隆细胞株,并证实了外源性hSp17基因在卵巢癌HO8910细胞中稳定表达。结论成功构建了稳定表达外源性hSp17蛋白的卵巢癌细胞株;其可为卵巢癌的免疫治疗奠定基础。

• 单位
  镇江市第三人民医院; 中国人民解放军东部战区总医院