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摘要
目的：构建组成型雄烷受体（constitutive androstane receptor,CAR）人源化小鼠模型，进行活化特性有效性验证。方法：应用转录激活因子样效应物核酸酶技术构建CAR基因敲除小鼠模型；应用细菌人工染色体大片段序列转基因方法构建人源CAR全长序列转基因小鼠模型。对杂交后获得的CAR人源化小鼠模型进行测序鉴定和基因扩增片段鉴定，并分析人源CAR剪接体肝组织丰度特征。比较野生小鼠、CAR基因敲除小鼠、CAR人源化小鼠肝、肠组织CAR表达水平，采用荧光定量聚合酶链反应法检测给予物种特异性激活剂后肝组织靶基因细胞色素P450 2B、3A相对表水平。结果：测序鉴定CAR基因敲除小鼠基因缺失10个碱基对序列，人源CAR序列整合进入小鼠基因组。CAR人源化小鼠剪接体肝组织丰度与人肝组织相同，对小鼠特异性激活剂无应答，给予人特异性激活剂后肝组织细胞色素P450 2B、3A表达显著升高（P<0.01）。结论：构建的CAR人源化小鼠模型在肝组织生理表达水平、剪接体丰度和物种特异性激活剂应答方面均符合人源化特征。
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