当归多糖促进骨髓移植小鼠造血功能重建及其机制研究

作者：牛雪芳; 廖奎; 汪子铃; 侯吉颖; 曾娣; 肖含先之; 杜坤航; 王璐; 王亚平^*

来源：陆军军医大学学报, 2022, 44(16): 1621-1628.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202201032

• 当归多糖
• 骨髓移植
• 造血功能重建
• 造血微环境
• 造血因子

目的 探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides, ASP)对接受供体骨髓细胞移植后受体小鼠的造血功能重建及其初步机制。方法 取10只20～25 g雄性C57BL/6J小鼠作为供体小鼠，提取其骨髓细胞；将30只8～10周龄同系受体雌性小鼠经8.0 Gy的X射线(一次性致死剂量)全身辐射后，将供体小鼠的骨髓细胞通过尾静脉输入受体小鼠体内来构建小鼠骨髓移植模型，随后采用简单随机化法将受体小鼠分为3组，每组10只。对照组(Ctrl组):受体小鼠辐射后不移植骨髓细胞；骨髓移植组(BMT组):受体小鼠辐射后移植骨髓细胞(5×106个/只);骨髓移植+当归多糖组(TASP组):辐射剂量与移植骨髓细胞数同骨髓移植组，同时给受体小鼠腹腔注ASP (100 mg/kg×9 d)。期间动态测量受体小鼠体质量变化。移植骨髓细胞后第9天，PCR方法鉴定受体鼠脾集落细胞和骨髓细胞的Y染色体基因。采集受体小鼠眼眶血，检测白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)数量。取受体小鼠股骨，计数每只股骨有核细胞数，流式细胞术检测骨髓细胞周期。培养受体鼠骨髓基质细胞，观察基质细胞贴壁情况，EDU法检测骨髓基质细胞增殖能力，并计数成纤维细胞集落生成单位(CFU-F)。ELISA法检测受体鼠血清和骨髓基质细胞培养上清液中相关造血因子含量。结果 对照组小鼠7 d内全部死亡，BMT组与TASP组小鼠全部存活。两个移植组的小鼠体质量5～6 d降至最低后开始恢复，TASP组恢复更快(P<0.05)。在雌性受体小鼠脾集落细胞和骨髓造血细胞中检测到Y染色体基因。TASP组小鼠外周血WBC、RBC、HGB数量与每只股骨有核细胞数均显著高于BMT组(P<0.05;P<0.01),且骨髓细胞G0/G1期细胞比例下降，S期和G2/M期细胞比例增高(P<0.05)。TASP组受体小鼠的骨髓基质细胞贴壁数量、增殖能力和形成CFU-F集落数量也明显高于BMT组(P<0.05),且小鼠血清粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素3(IL-3)以及骨髓基质细胞培养上清液中GM-CSF和干细胞因子(SCF)含量显著增高(P<0.05)。结论 ASP可促进移植骨髓细胞在受体小鼠体内造血功能的重建，其初步机制可能与改善造血微环境和促进造血因子分泌有关。

• 单位
  重庆医科大学; 基础医学院; 重庆医科大学附属第一医院