RNA干扰沉默瘦素基因对人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长的影响

作者：承柯伟; 杨明夏; 俞小卫

来源：国际呼吸杂志, 2018, 38(12): 881-885.

• 瘦素
• RNA干扰
• A549细胞
• 移植瘤

目的利用RNA干扰技术沉默人肺腺癌A549细胞中的瘦索(Leptin)基因的表达,探讨Leptin基因表达沉默对人肺腺癌A549细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法以慢病毒为载体,将携带siRNA的Leptin基因及宅质粒转染人肺腺癌A549细胞,转染成功后将转染Ieptin-siRNA的人肺腺癌A549细胞(干扰组)、转染空质粒的人肺腺癌A549细胞(阴性对照组)及未转染任何序列的人肺腺癌A519细胞(宅自对照组)分别接种于BALB/C裸鼠右腋窝皮下,构建裸鼠皮下移植瘤模型,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤率、瘤体体积、瘤体重量,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率。免疫组织化学及免疫蛋白印迹分别检测瘤体组织中Leptin蛋白表达情况,原位末端凋亡法检测移植瘤组织凋亡情况。结果干扰组与空白对照组及阴性对照组相比,裸鼠移植瘤瘤体体积、瘤体重量明显降低,其体积抑瘤率为(59.3±3.1)%,瘤重抑瘤率为(64.5±4.8)%,差异均有统计学意义(F=9.118、9.121,P值均<0.05)。干扰组Leptin蛋白表达较空白对照组及阴性对照组明显减少,差异有统计学意义(F=13.784,P<0.05)。干扰组沉默Leptin基因后细胞凋亡增多,凋亡率为(47.3±4.1)%,明显高于空白对照组[(5.6±1.5)%]及阴性对照组[(7.2±2.8)%],差异有统计学意义(F=14.537,P<0.05)。结论沉默人肺腺癌A549细胞中的Leptin基因表达可以有效抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,Leptin基因有望成为肺腺癌基因治疗的一个新靶点。

• 单位
  南京医科大学