养精胶囊通过PI3K-Akt-Cyclin D1通路促进小鼠精原干细胞的增殖

作者：蔡滨; 金保方^*; 孙大林; 邓伟民

来源：中国男科学杂志, 2020, 34(06): 24-29.

• 养精胶囊
• 精原干细胞
• 细胞周期蛋白D1
• 细胞增殖

目的研究养精胶囊促进小鼠精原干细胞(SSCs)增殖的分子机制。方法提取4～6 d雄性BALB/c小鼠睾丸中的SSCs,纯化并传代获得稳定的细胞。将不同浓度的养精胶囊水提物加入SSCs中,CCK-8检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期,q RT-PCR以及Western blot检测Cyclin D各个亚型的表达。之后进行阻断实验,在加入养精胶囊前预先加入si RNA-Cyclin D1或者LY294002(PI3K阻断剂),同样的方法检测细胞的增殖活性和细胞周期,以及p-Akt/Akt、Cyclin D1的表达情况。结果0.01、0.1、1 mg/m L浓度的养精胶囊在24、36、48 h这三个时间点可以促进SSCs的增殖,1 mg/m L养精胶囊作用细胞48 h后,S期细胞比例升高22.7%,有统计学差异。1 mg/m L养精胶囊可以促进Cyclin D1的表达,而对Cyclin D2、Cyclin D3的表达无影响。阻断实验表明,预先加入si RNA-Cyclin D1或者LY294002可以阻断PI3K-Akt-Cyclin D1通路,降低SSCs的增殖活性,减少S期细胞比例,抑制p-Akt/Akt、Cyclin D1的表达。结论补肾填精中药养精胶囊可以通过PI3K-Akt通路作用于Cyclin D1,提高S期细胞比例,促进SSCs增殖。

• 单位
  东南大学附属中大医院