脊髓脂质运载蛋白-2对大鼠吗啡耐受形成的影响

作者：王芬; 刘清珍; 刘健; 江姿潞; 谢滔; 李伟彦

来源：中国药理学通报, 2015, 31(04): 565-569.

• 吗啡耐受
• 脂质运载蛋白-2
• 小干扰RNA
• 小胶质细胞
• 磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶
• 脊髓

目的探索用RNA干扰(RNAi)法沉默脊髓脂质运载蛋白-2(lipocalin-2,LCN2)的表达及其对正常大鼠吗啡耐受形成的影响。方法鞘内置管成功的♂SD大鼠48只,体质量180220 g,随机均分为4组,每组12只:Ⅰ组对照组、Ⅱ组吗啡耐受组、Ⅲ组错义小干扰RNA(mismatch siRNA,MM siRNA)组、Ⅳ组LCN2小干扰RNA(LCN2 siRNA)组。所有大鼠鞘内置管术后d 6确定导管位置,记为d 0。d 28连续7 d,每天2次进行皮下注射,每次注射剂量10μg·g-1,Ⅰ组大鼠皮下注射生理盐水(normal saline,NS),Ⅱ-Ⅳ组大鼠皮下注射吗啡建立吗啡耐受模型。各组大鼠每天皮下给药前分别鞘内注射10μL DEPC溶液、10μL DEPC溶液、10μL含4μg MM siRNA的DEPC溶液和10μL含4μg LCN2 siRNA的DEPC溶液。d 1、d 9,测定所有大鼠的基础热缩足反应潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)及皮下注射吗啡后45 min的PWTL,并计算吗啡的最大可能镇痛效应百分比值(%maximal possible effect,%MPE)。d 9行为学测试结束后,取脊髓腰膨大,用Western blot法检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)及LCN2蛋白表达水平,用免疫组织荧光染色法检测小胶质细胞标记物Iba1的表达。结果 d 9,与Ⅰ组比,Ⅱ、Ⅲ组大鼠%MPE值明显下降(P<0.05),腰段脊髓LCN2、p-p38 MAPK、Iba1表达明显增加(P<0.05)。与Ⅱ组比,Ⅳ组大鼠的%MPE值明显增加(P<0.05),脊髓LCN2、p-p38MAPK、Iba1表达明显下降(P<0.05)。结论鞘内注射LCN2 siRNA沉默脊髓LCN2的表达能够部分抑制吗啡耐受的形成,该现象可能与其抑制脊髓背角小胶质细胞的活化及脊髓p-p38 MAPK的表达有关。

• 单位
  徐州医科大学; 中国人民解放军第二军医大学; 南京军区南京总医院