山奈酚通过抑制p38 MAPK通路减轻6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞炎症

作者：蔡美云; 庄文欣; 吕娥; 付文玉^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2020, 36(07): 583-589.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009028

• 山奈酚(KAE)
• 帕金森病
• PC12细胞
• p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)
• 神经炎症

目的研究山奈酚(KAE)对神经毒素6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞炎性损伤的保护作用,并探讨其是否与抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路有关。方法将PC12细胞分为对照组、 100μmol/L 6-OHDA处理组、 6-OHDA联合(20、 40、 60、 80、 100)μmol/L KAE处理组、 KAE组,培养24 h。倒置显微镜下观察PC12细胞的形态变化, CCK-8法检测细胞活力;在筛选出KAE的最佳作用剂量基础上,应用免疫细胞化学染色法检测环加氧酶2(COX2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、核因子κB(NF-κB)的表达, Western blot法检测COX2、 iNOS、 NF-κB蛋白水平。为探讨其作用机制,在PC12细胞的6-OHDA培养体系中分别给予KAE和p38 MAPK通路抑制剂SB203580, Western blot法检测iNOS、 COX2、 NF-κB、 p38 MAPK、磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK)的蛋白水平。结果与对照组比较, 6-OHDA组细胞数量显著减少,大部分细胞胞体皱缩,聚集成团;与6-OHDA组相比, 6-OHDA联合(20、 40、 60、 80、 100)μmol/L KAE处理组细胞数量增多,形态明显改善,且KAE浓度为80μmol/L时,细胞形态最好、数量最多。6-OHDA处理组细胞COX2、 iNOS、 NF-κB表达明显增高;与6-OHDA组比较, 6-OHDA联合80μmol/L KAE处理组上述分子的表达显著下降。6-OHDA组细胞的COX2、 iNOS、 NF-κB、 p38 MAPK、 p-p38 MAPK的蛋白水平明显升高,而在6-OHDA联合KAE组和6-OHDA联合SB203580组,以上蛋白表达水平较6-OHDA组显著降低。结论 KAE抑制p38 MAPK通路减轻6-OHDA所致的PC12细胞损伤。

• 单位
  潍坊医学院; 基础医学院