摘要

目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠的潜在抗慢性应激作用. 方法 48只成年SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、治疗组,每组16只.对照组仅做T10椎板切除术,模型组和治疗组采用改良Allen法制造大鼠T10脊髓损伤模型.造模后7d,对照组、治疗组于L4-5水平向蛛网膜下腔注射100μl含1.0×106 BMSCs的Hank缓冲液的混悬液,模型组注射等量Hank缓冲液.术前、术后BBB评分评估大鼠后肢运动功能.移植后14,28 d采集各组新鲜血液,ELISA法检测血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)及血清皮质酮(CORT)含量;取脑组织,行免疫组织化学染色检测海马、杏仁核区α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体蛋白谷氨酸受体1(GluR1)和谷氨酸受体2(GluR2)的表达.结果 造模后,模型组、治疗组BBB评分差异无统计学意义,但两者均低于对照组(P<0.05).BMSCs移植后,治疗组大鼠BBB评分较模型组持续增高,移植后21,28 d治疗组[(9.85±0.82)分、(11.23±0.68)分]和模型组[(8.42±0.39)分、(8.84±0.25)分]均低于对照组[(21.00±0.00)分、(21.00 ±0.00)分](P<0.05).移植后14,28 d ACTH浓度模型组[(104.80±6.16) pg/ml、(101.40 ±2.33) pg/ml]和治疗组[(98.50±4.07) pg/ml、(96.50±2.28) pg/ml]均高于对照组[(90.40±11.36)pg/ml、(83.20 ±5.22) pg/ml] (P <0.05);移植后14 d CORT浓度模型组、治疗组[(44.40±1.44) ng/ml、(43.30±1.17) ng/ml]均低于对照组(48.20±2.27) ng/ml (P <0.05),28d时模型组、治疗组[(70.40±1.90) ng/ml、(61.40±1.83) ng/ml]均高于对照组(46.40±1.49) ng/ml(P<0.05);治疗组均低于模型组(P<0.05);三组NE、E浓度的变化趋势与ACTH浓度变化趋势相似.移植后14,28 d GluR1、GluR2阳性细胞数治疗组与模型组比较,总体呈下降趋势(P<0.05);模型组与对照组比较,总体呈上升趋势(P<0.05);治疗组与对照组比较,总体呈下降趋势(P<0.05). 结论 BMSCs移植可下调应激相关激素ACTH、CORT、NE和E的分泌,以及海马、杏仁核区AMPA通道受体蛋白GluR1、GluR2的表达,表现出潜在的抗慢性应激作用,从而促进脊髓损伤后大鼠的后肢运动功能恢复.

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