重楼皂苷Ⅰ调控Sp1/miR-542-3p/ILK信号通路对肺癌细胞的抑制作用

作者：唐青; 王苏美; 吴万垠; 韩凌

来源：中华中医药杂志, 2022, 37(5): 2805-2812.

• 重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)
• 肺癌
• MiR-542-3p
• Sp1
• ILK
• 抗癌分子机制

目的:探讨中药重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对肺癌细胞生长的抑制作用及其分子机制.方法:采用MTT实验、划痕实验和细胞周期实验等检测PPⅠ对肺癌细胞生长、迁移和细胞周期的影响.采用Western Blot检测转录调控因子Sp1和整合素连接激酶ILK的蛋白表达水平.qPCR实验测定miR-542-3p和ILK mRNA的表达水平.细胞瞬时转染技术用于转染ILK和Sp1过表达质粒或siRNA.双荧光素酶基因报告实验用于测定ILK基因启动子活性.结果:PPⅠ显著抑制A549和PC9细胞活力,且呈时间和剂量依赖方式.Western Blot结果显示,PP Ⅰ明显下调ILK蛋白表达水平.沉默ILK抑制细胞活力和细胞迁移,阻滞细胞周期S期.过表达ILK促进细胞活力,并显著逆转PPI对A549和PC9细胞的生长抑制作用.miR-542-3p通过直接与ILKmRNA的3'-UTR结合,从而抑制ILK蛋白的表达.PP Ⅰ有效提高miR-542-3p的表达水平,显著下调转录调控因子Sp1的蛋白表达水平.Sp1可与ILK基因启动子区域结合,沉默Sp1显著下调ILK启动子活性并减少ILK蛋白的表达水平.过表达Sp1显著逆转PP Ⅰ对ILK蛋白表达的下调作用.结论:PPⅠ通过增加miR-542-3p的表达和减少Sp1的表达,进而下调ILK蛋白的表达水平,最终显著抑制肺癌细胞的生长.