重组人组织激肽释放酶结合蛋白的高密度毕赤酵母表达、纯化和生物学活性

作者：张倩; 邢永梅; 刘嘉; 刁勇

来源：药学学报, 2013, (07): 1107-1112.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2013.07.026

• 组织激肽释放酶结合蛋白
• 高密度发酵
• 纯化
• 生物学活性 kallistatin
• high-density fermentation
• purification
• bioactivity

研究重组人组织激肽释放酶结合蛋白(rHKal)的高密度毕赤酵母表达、纯化以及生物学活性。以质粒pPIC9-Kal/GS115(His4)转化毕赤酵母细胞,在7.5 L培养罐内高密度细胞发酵,以1%～2%的甲醇诱导表达rHKal。发酵上清液经疏水层析、亲和层析和凝胶层析分离rHKal。通过MTT及小管形成实验评价rHKal对HUVEC的生物学活性。收获发酵上清液内rHKal的表达水平为50 mg.L 1,纯化后rHKal原液的纯度达98%以上。rHKal对HUVEC的增殖抑制活性呈剂量依赖性,但对其小管形成抑制作用的量效关系呈U型曲线。rHKal具有新生血管形成抑制活性,本研究为rHKal的生产...

• 单位
  华侨大学