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摘要
目的从医院污水中分离筛选铜绿假单胞菌噬菌体,检测其裂解谱和生物学特性,探讨其应用价值。方法以铜绿假单胞菌标准菌株ATCC 27853和临床分离菌株为宿主,从未处理的医院污水中分离筛选铜绿假单胞菌噬菌体,检测其裂解谱,观测裂解效率最高的噬菌体的形态及生物学特性等。结果从污水中分离纯化到6株铜绿假单胞菌噬菌体,对162株不同药敏试验结果的临床菌株(包括63株多重耐药菌)裂解效率最高(79. 63%)的噬菌体命名为PA-27-1,能裂解80. 95%(51/63)的耐药菌株。噬菌体PA-27-1在双层琼脂平板上形成直径2～3 mm的圆形透明且边界清晰的噬菌斑;头部呈多面立体对称结构,尾短;最佳感染复数为0. 000 1,与宿主菌液混合后即有80%的噬菌体吸附,孵育4 min后有98%的噬菌体吸附;潜伏期为0～20 min,以MOI=10试验时,裂解期为20～60 min,60 min后为平台期,裂解量约为248;在pH 6～10和≤50℃的环境中稳定性良好,对氯仿具有较高的耐受性,核酸类型为dsDNA。结论分离筛选到的铜绿假单胞菌噬菌体PA-27-1具有较宽的宿主谱,对多重耐药铜绿假单胞菌具有较强的裂解能力,吸附力强,裂解量大,酸碱和热稳定性好,可作为储备噬菌体,并为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供基础和依据。
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单位第三军医大学; 中国人民解放军陆军军医大学
