一种人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的瞬时表达及性质分析

作者：宋宪铭; 安晨; 张超; 熊颖; 张祺; 陈继军^*

来源：微生物学免疫学进展, 2019, 47(02): 17-21.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2019.02.003

• 狂犬病病毒
• 单克隆抗体
• 快速荧光灶抑制试验(RFFIT)
• 瞬时表达

目的瞬时表达人源重组抗狂犬病病毒单克隆抗体,并对抗体性质进行分析。方法 PCR法扩增抗体轻、重链可变区并分别构建真核表达质粒;瞬时转染HEK293 EBNA1细胞;抗体经亲和纯化后,CE-SDS法分析纯化后抗体单体比例,用快速荧光灶抑制试验(RFFIT)分析抗体体外抗狂犬病病毒中和活性,ELISA分析抗体与3aG、CTN、PV及CVS株的结合。结果提取瞬时表达质粒的A260/280 nm比值在2.0～2.1之间纯化后抗体非还原CE-SDS单体纯度为74.4%;还原CE-SDS抗体轻、重链峰合计占比超过95%;抗体RFFIT体外中和活性为293.37 IU/mL,比活达628.21 IU/mg,抗体与3aG、CTN、PV及CVS株交叉反应均为阳性。结论该株抗体具有较高体外抗狂犬病病毒中和活性,与主要疫苗株均有较强结合。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司